【摘 要】
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目的：树突状细胞(Dendritic Cells,DCs)在启动和维持气道变应性炎症的关键细胞,而骨髓来源间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs)已被证实能够调控DCs的分化、成熟和功能.先前报道了iPSC来源的间充质干细胞(induced Pluripotent Stem Cell-derived，MSCs)能够抑制小鼠体内的气道变应性
【机 构】
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中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院 中山大学耳鼻咽喉科研究所
【出 处】
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2015年全国鼻科年会暨第七届鼻部感染与变态反应疾病专题学术会议
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目的：树突状细胞(Dendritic Cells,DCs)在启动和维持气道变应性炎症的关键细胞,而骨髓来源间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs)已被证实能够调控DCs的分化、成熟和功能.先前报道了iPSC来源的间充质干细胞(induced Pluripotent Stem Cell-derived，MSCs)能够抑制小鼠体内的气道变应性炎症,但机制仍不清.本研究旨在验证DCs是否介导了iPSC-MSCs对小鼠气道变应性炎症的免疫调节作用.
方法：分离D0ll.10小鼠骨髓细胞，体外加入GM-CSF和IL-4培养诱导分化为DCs，免疫磁珠分选CDllc+DCs细胞进行后续实验。在CDllc+DCs体外培养体系中加入OVA预刺激(OVA-DCs)，或加入OVA和iPSC-MSCs共培养(OVA-iPSC-MSCs-DCs) 48小时，然后分离OVA-DCs和OVA-iPSC-MSCs-DCs经气管内注射入D0ll.10小鼠（注射细胞数106/只），CDllc+DCs气管内注射和PBS气管内注射分别作为阴性对照组和正常对照组，第7～9天进行OVA雾化激发，第10天收取肺组织进行HE、PAS染色和评分；取肺泡灌洗液进行细胞分类计数，ELISA检测肺泡灌洗液中IL-4、IL-5和IL-13的水平。
结果：分选获取的CDllc+DCs纯度>90％。和PBS致敏+OVA雾化激发组相比，CDllc+DCs致敏+OVA雾化激发组的肺内气管周围和血管周围均无明显炎性细胞浸润。而经气管内注射OVA-DCs致敏+OVA雾化激发可诱发典型的气道变应性炎症，具体表现为：HE染色显示肺内气管周围和血管周围大量炎性细胞浸润；PAS染色显示气管上皮杯状细胞显著螬生；肺泡灌洗液细胞总数和嗜酸性粒细胞数显著增加；肺泡灌洗液中IL-4、IL-5和IL-13水平显著升高。与OVA-DCs致敏+OVA雾化激发组相比，气管内注射OVA-iPSC-MSCs-DCs致敏+OVA雾化激发组的小鼠气道变应性炎症明显减轻，包括肺HE、PAS染色评分显著下降，肺泡灌洗液的炎性细胞总数和嗜酸性粒细胞数均明显减少，肺泡灌洗液中的IL-4、IL-5和IL-13水平也显著下调。
结论：DCs介导了iPSC-MSCs对OVA诱导的小鼠体内气道变应性炎症的免疫调节作用。
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