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一种高效抗菌肽V13KL原核表达条件的优化

来源 :中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十七次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：freecase

【摘 要】

：

V13KL是通过化学合成获得的抗菌肽,具有高效、广谱、低溶血性等特点。将V13KL编码基因片段克隆到原核表达载体pET30b(+),并在目的蛋白N端设计肠激酶酶切位点,构建出pET30b(+)-VK13L重组质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21 (DE3),优化诱导条件,使得抗菌肽得到了高效表达。经Tricine-SDSPAGE和Western Blotting鉴定,目的蛋白的分子量与预期一致。实验

【作 者】

：

QIN Ying 秦莹 关继羽 GUAN Ji-yu CHEN Yue 陈玥 KONG De-long 孔德龙 AN Pei-pei 安培培 TANG Bo 唐博 CHEN Yu-xin 陈育新 岳占碰 YUE Zan-peng LI Zi-yi 李子义 

【机 构】

：

Jilin Provincial Key Laboratory of Animal Embryo Engineering, Institute of Animal and Veterinary Med

【出 处】

：

中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十七次学术研讨会

【发表日期】

：

2012年7期

【关键词】

：

抗菌肽 基因工程 原核表达 分子鉴定 

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　　V13KL是通过化学合成获得的抗菌肽,具有高效、广谱、低溶血性等特点。将V13KL编码基因片段克隆到原核表达载体pET30b(+),并在目的蛋白N端设计肠激酶酶切位点,构建出pET30b(+)-VK13L重组质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21 (DE3),优化诱导条件,使得抗菌肽得到了高效表达。经Tricine-SDSPAGE和Western Blotting鉴定,目的蛋白的分子量与预期一致。实验结果表明,V13KL基因成功克隆并且表达,在诱导体系中加入1mM IPTG诱导6h便可检测到蛋白表达。

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