流式细胞仪检测T淋巴亚群细胞内细胞因子方法的探索

来源 :第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编 | 被引量 : 1次 | 上传用户:LUOJIAJUN32
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<正> 目的建立一种准确、敏感、方便的检测T淋巴亚群细胞内细胞因子的方法。方法所用试剂均购自晶美生物技术有限公司。0.5ml外周血加0.5ml RPMI1640于培养孔中,同时加入刺激剂佛波脂和离子霉素(ionomycin),阻断剂莫能霉素(monensih),在CO2孵箱中孵育5小时后收集细胞,取120ul加入CD3-Cychrome,CD8-FITC单抗标记细胞,溶血、洗涤后加入1%多聚甲醛固定,加入破膜液,加入IFN-γ-PE或IL4-PE,孵育20分钟,再加入破膜液,离心洗涤,加0.5ml PBS,即上流式细胞仪检测。结果1.预试验时加入CD4-FITC,发现经PMA刺激后,T淋巴细胞表面CD4表达受佛波脂抑
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