【摘 要】
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目的:探讨下调永生化人支气管上皮细胞(Human Bronchial Epithelial Cells,BEAS-2B)端粒保卫蛋白1(POT1)的表达对煤焦沥青烟提取物(Coal Tar Pitch Extracts,CTPE)致端粒损伤
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室郑州450001
【出 处】
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中国环境诱变剂学会两专委会、五省市学术联合学术会议暨环境·辐射与健康防护学术交流会
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目的:探讨下调永生化人支气管上皮细胞(Human Bronchial Epithelial Cells,BEAS-2B)端粒保卫蛋白1(POT1)的表达对煤焦沥青烟提取物(Coal Tar Pitch Extracts,CTPE)致端粒损伤的作用.方法:根据POT1的mRNA序列分别设计和合成shRNA质粒表达载体.BASE-2B细胞以CTPE组,DMSO溶剂对照组和空白对照组分别进行培养.培养至1代、10代、20代和30代时分别对细胞进行转染,转染后培养至第7d时进行端粒长度、POT1和hTERT的mRNA及蛋白表达情况的检测.结果:将针对POT1基因合成的shRNA表达载体,转染入BASE-2B细胞后成功抑制POT1基因的表达.与对照组相比,抑制POT1基因的表达可导致hTERT的mRAN表达水平下调(F=25.008,P=0.000),端粒DNA相对长度缩短(F=14.617,P=0.001),随着染毒时间的增加,端粒DNA相对长度缩短(F=4.932,P=0.006).结论:抑制POT1基因表达可间接促进CTPE对BASE-2B细胞的恶变作用.
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