研究目的:探究在低氧状态下低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)通过诱导小鼠骨样细胞系MLO-Y4表达核因子κB受体活化因子配体(RANKL),参与破骨细胞生成。研究方法:去铁胺甲磺酸(Deferoxamine Mesylate,DFO)体外模拟低氧环境培养小鼠骨样细胞系MLO-Y4,利用siRNA转染MLO-Y4敲低HIF-1α表达来验证HIF-1α调控作用,采用细胞增殖/毒性检测实验(CCK-8法)检测0h,12h,24h及48h的细胞增殖活性,用RT-PCR技术检测低氧状态下MLO-Y4表达HIF-1α及核因子κB受体活化因子配体(RANKL) mRNA水平,免疫荧光和Western-blot检测低氧状态下MLO-Y4表达HIF-1α与RANKL蛋白水平。研究结果:100μmol/L DFO作用下,24h内促使MLO-Y4增殖活性升高,随着时间延长可促使细胞凋亡(p<0.05)。qPCR结果显示低氧组与对照组相比HIF-1αmRNA水平没有显著差异,RANKL mRNA水平在随低氧持续时间先升高后降低,在24h达到最高峰(p<0.05)。Western-blot结果显示低氧组HIF-1α蛋白水平在24h与对照组相比差异最为显著,RANKL蛋白水平在12h、24h较对照组有显著差异(p<0.05)。低氧条件下siHIF可使HIF-1αmRNA和蛋白水平显著降低,RANKL mRNA和蛋白水平也随之降低(p<0.05)。研究结论:低氧状态通过调控骨样细胞MLO-Y4激活HIF-1α蛋白稳定表达,进而上调RANKL,参与破骨细胞生成低氧状态通过调控骨样细胞MLO-Y4激活HIF-1α蛋白稳定表达,进而上调RANKL,参与破骨细胞生成。