目的：探讨发形霞水母(Cyanea capillata)毒素制备方法、不同处理方法对毒素溶血活性的影响以及溶血活性蛋白的分离纯化。方法：采用剧烈机械振荡和离心相结合的方法快速制备水母毒素样品,显微观察制备过程中口腕部触手上刺丝囊的发射情况；分析脱盐、冻干、超滤等处理方法对毒素溶血活性的影响,分别利用阴离子交换层析和凝胶过滤层析方法定向分离其中的溶血活性蛋白。结果：口腕部触手上的刺丝囊主要有梭形、椭圆形和球形三种类型,毒素的半数溶血分数(HU50)为95 μg/mL；直接冻干处理再复溶的毒素溶血活性保持不变,但脱盐后,冻干再复溶,其溶血活性消失；用100 kDa超滤管浓缩毒素样品,浓缩液有溶血活性,浓缩后的滤液没有溶血活性；阴离子交换层析的穿透峰和洗脱峰组分都没有溶血活性,凝胶过滤层析前毒素用3 kDa超滤管浓缩,超滤过程中析出的沉淀有溶血活性,层析后的5个洗脱峰组分都没有溶血活性。结论：剧烈机械振荡能有效刺激刺丝囊发射,并释放毒液,减少了组织蛋白或非毒素蛋白的混入；冻干处理不影响毒素的溶血活性,盐溶液环境有利于毒素溶血活性的保持；发形霞水母毒素溶血活性蛋白的分子量大于100 kDa,溶解性弱,易聚集形成沉淀,并且在纯化过程中溶血活性降低或丧失。