罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffery]为葫芦科(Cucurbitacease)罗汉果属藤本植物,主产于广西桂林,云南、贵州、广东、湖南等地也有分布。成熟的罗汉果果实味极甜,主要富含葫芦烷型四环三萜皂苷,其中罗汉果皂苷V(mogroside V)为主要的甜味成分,干重含量可达1.6%。目前从罗汉果果实中提取的罗汉果甜苷作为一种理想的低卡路里天然甜味剂已广泛应用于饮料与食品添加行业中。迄今有关罗汉果皂苷V的体内外吸收特点和代谢过程研究甚少。本研究从罗汉果果实中分离纯化得到足量的罗汉果皂苷V纯品(纯度≥99%),通过采用HPLC-ESI-IT-TOF-MSn方法对罗汉果皂苷V的体内、体外代谢成分进行检测分析,鉴定代谢产物,推导代谢途径,寻找其吸收入血药效活性成分。新鲜成熟罗汉果经乙醇浸提,浓缩,提取液经D101大孔吸附树脂、硅胶、HP-20ss等分离材料和制备液相等分离纯化,得到1.73g罗汉果皂苷V纯品(HPLC检测,纯度≥99%)。将此纯品水溶解,以50mg/kg剂量灌胃SD雄性大鼠,收集含药和空白尿液、粪便、血液和各脏器组织,纯化生物样品,通过HPLC-ESI-IT-TOF-MSn技术检测。共分析检测出罗汉果皂苷V体内代谢产物36个,其中尿液中5个,粪便中21个,血浆中1个,组织中25个,代谢产物结构都属葫芦烷型三萜及其苷类,主要发生的代谢反应有脱糖基、异构化、羟基化等,同时发现体内降解后的苷元结构发生了高度氧化,苷元结构上接了6个或者7个羟基,但却能稳定存在。在血液中检测到罗汉果皂苷ⅡE成分的存在,推测其可能为活性药效成分。此外,我们还进行了罗汉果皂苷V的体外代谢研究,包括大鼠肝S9体外孵化、体外人工胃液的稳定性实验、人肠道菌群转化实验。采用HPLC-ESI-IT-TOF-MSn技术,共发现罗汉果皂苷V体外代谢产物13个,降解反应类型为糖基化、异构化、羟基化等。罗汉果皂苷V在胃酸条件下不稳定,时间越长降解越严重,在肠道菌群作用下,仅发生脱糖基和加糖基2种反应,而在大鼠肝S9体外孵化体系中并不代谢。