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目的 本研究的目的是观察P物质及其受体(NK1受体)在去卵巢诱导的小鼠骨质疏松性模型松质骨中的表达变化,并使用P物质特异性阻断剂L-703606干预,观察阻断P物质信号对去卵巢和卵巢完整小鼠骨量的影响,及其机制.材料与方法 第一部分实验,48只8周龄C57BL/6J小鼠,根据干预时间和措施,随机分为SHAM组、OVX组以及OVX+E2组(卵巢切除后立即给予雌激素替代治疗),每组16只.每组实验动物分别于干预后第3周和第6周处死一半动物.采用两步醋酸法提取干骺端蛋白,并使用酶联免疫试剂盒(Enzyme Immunosorbent Assay,EIA)分别检测第一步(神经组织来源)和第二步(非神经组织来源)提取蛋白内的P物质含量；免疫组化染色L3椎体和/或股骨远端检测P物质和NK1受体表达.第二部分实验32只9周龄雌性小鼠随机分为四组：SHAM组、SHAM+L组、OVX组以及OVX+L组,每组8只.SHAM和SHAM+L组小鼠接受假手术(仅显露卵巢),而OVX和OVX+L组接受卵巢切除手术.模型建立3周后,SHAM+L和OVX+L组小鼠接受L-703606连续3周腹腔注射,SHAM和OVX组接受溶媒——二甲基亚砜连续3周腹腔注射.采用2×2析因设计实验方案,观察OVX模拟的雌激素缺乏和L-703606阻断P物质信号对骨代谢的主效应和交互效应.取第三腰椎(3rd lumbar vertebrae,L3)和右侧胫骨行生物力学测试；取左侧胫骨行micro-CT检测；取左侧股骨行实时real-time PCR检测,取右侧股骨行组织学检测.结果 模型建立后第3和第6周,OVX组小鼠股骨骨骺、干骺端以及L3椎体SP免疫阳性产物均明显低于SHAM组,给予雌激素替代治疗组SP免疫阳性表达高于OVX组表达.P物质阳性物质呈片状或束状,位于骨小梁表面或血管周围.EIA结果表明第一次蛋白提取物SP含量高于第二次蛋白提取物SP含量,提示SP在神经组织表达量高于非神经组织,且OVX小鼠胫骨近端干骺端神经组织、非神经组织以及总中SP含量较SHAM组均明显降低.L-703606干预导致正常和去卵巢小鼠骨矿含量和骨密度降低.MicroCT结果提示L-703606导致正常和OVX小鼠松质骨微细结构破坏,具体表现为骨容积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度降低,而骨小梁分离度增加.但是,L-703606对皮质骨微细结构参数,如骨骼总面积、皮质骨面积、皮质骨面积分数和皮质骨厚度,均无明显影响.生物力学结果表明阻断P物质信号导致L3和胫骨力学性能降低.阻断P物质减少松质骨成骨细胞数量和类骨质容积,增加破骨细胞数量,并明显降低OPG/RANKL的比率.L-703606也下调干骺端松质骨血管形成因子的表达,但对体重、子宫重量以及血清雌激素水平无明显影响.结论 卵巢切除诱导松质骨SP表达下调.阻断P物质信号导致正常和去卵巢小鼠骨量丢失,这一效应可能与减少松质骨血管形成因子表达相关.P物质信号可能是维持正常和去卵巢小鼠骨量的重要因素.