【摘 要】
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目的：建立一套较为稳定的测定人体唾液中还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值的方法. 方法：取人唾液500 uL, 4 ℃环境下保存,13000 r/m 离心5 min,取上清,即为
【机 构】
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北京中医药大学,中药学院,北京市朝阳区望京南路中环6 号,100102
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目的：建立一套较为稳定的测定人体唾液中还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值的方法. 方法：取人唾液500 uL, 4 ℃环境下保存,13000 r/m 离心5 min,取上清,即为样本,保存备用；取上述样本100 uL,加3.8 mLPBS 缓冲盐溶液(pH8.0)和100 uL 1 mg/mL 的邻苯二甲醛(OPT)甲醇溶液,室温下避光反应15 min 后,在激发波长342 nm,吸收波长420 nm,狭缝宽度10 nm,检测电压700 V 的检测条件下荧光分光光度计进样,得GSH 荧光响应值；取上述样本100 uL,加入N-乙基顺丁烯二酰亚胺(NEM)100 uL,室温反应30 min 后,加3.7 mL 0.4％NaON 溶液和100 uL 1 mg/mL 的邻苯二甲醛(OPT)甲醇溶液,室温下避光反应15 min,在相同的荧光检测条件下测定样品,即得GSSG 荧光响应值,前后两者响应值相除即得GSH 与GSSG 比值.
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