利用抑制差减杂交筛选到不同含油量种子胚珠特异表达基因克隆217个,测序得到43个基因。利用RT-PCR和Northern杂交方法验证选出阳性基因36个。其中30个基因在高含油量种子中表达量高,6个在低含油量种子中表达量高。通过研究基因相应蛋白的性质,基因表达特性及一些基因/蛋白的相互作用,推论一些基因参与油脂合成调控的可能机制,研究发现油脂合成是一个多个细胞器不同代谢途径参与的系统途径;叶绿体和糖代谢功能的改善可能是影响油脂合成的重要因素;信号转导基因在其中参与了对部分酶的活性或稳定性起了重要的调节作用。依据这些基因介导油脂合成调控途径的不同对应分为三类:1)光合作用相关;2)糖代谢相关;3)其他调节方式如Ca2+信号通路,从中分别选取合适的靶基因进行深入探讨它们参与油脂合成的具体功能。其中一差异表达基因,与拟南芥PDK(丙酮酸脱氢酶激酶)基因高度同源。PDK在线粒体能量代谢中起着重要的调节作用。目前植物中只从拟南芥,水稻和玉米中分离到了PDK基因,对它们的具体功能了解还很有限,特别是它在油脂合成中的作用还不清楚。我们分离了BnPDK基因组和cDNA全长序列,并进一步分析它在不同含油量菜籽不同发育时期的表达模式。现在正在用转基因技术探索PDK在油菜籽油脂合成中的生物学功能及可能的作用机理。研究结果将加深人们对植物PDK和油脂合成调控网络的了解,为深入了解植物线粒体如何参与种子油脂合成提供重要的实验证据。本研究内容在理论上可以丰富油菜籽油脂合成调控知识,在实践上为农业基因工程育种提高含油量提供理论依据。