【摘 要】
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目的：探讨白藜芦醇通过诱导自噬抑制HSC活化的机制.方法：采用不同浓度的白藜芦醇干预小鼠HSC株JS-1,自噬抑制剂3-MA、CQ及siAtg7干扰抑制自噬,zVAD-FMK抑制凋亡.MTT检测细胞活性,Western blot和RT-PCR检测HSC活化指标(α-SMA和Col.Ⅰ)、自噬指标(LC3B、p62、Atg7)、凋亡指标(Cleaved-Caspase3)的表达,RFP-GFP-LC
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院;上海中医药大学肝病研究所 上海中医药大学附属曙光医院;上海中医药大学肝
【出 处】
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第二十三次全国中西医结合肝病学术会议
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目的：探讨白藜芦醇通过诱导自噬抑制HSC活化的机制.方法：采用不同浓度的白藜芦醇干预小鼠HSC株JS-1,自噬抑制剂3-MA、CQ及siAtg7干扰抑制自噬,zVAD-FMK抑制凋亡.MTT检测细胞活性,Western blot和RT-PCR检测HSC活化指标(α-SMA和Col.Ⅰ)、自噬指标(LC3B、p62、Atg7)、凋亡指标(Cleaved-Caspase3)的表达,RFP-GFP-LC3B转染观察自噬小体的表达.结果：白藜芦醇能够抑制JS-1活化,抑制JS-1增殖和Col.Ⅰ的表达(P＜0.01),同时诱导JS-1自噬和凋亡,胞浆内LC3B黄、红荧光小点及LC3BⅡ蛋白表达增加,p62表达降低(P＜0.01)及C-Caspase3的表达增加(P＜0.01).阻断JS-1自噬或凋亡能够阻断白藜芦醇抑制HSC活化的作用,3-MA、CQ和siAtg7干扰抑制自噬(P＜0.01),或zVAD-FMK抑制凋亡(P＜0.05)后,能够逆转白藜芦醇抑制Col.Ⅰ表达的作用.白藜芦醇主要通过SIRT1和JNK抑制JS-1自噬和活化,加入SIRT1阻断剂EX527后能够明显抑制自噬,LC3B Ⅱ表达降低(P＜0.01),并阻断白藜芦醇抑制Col.Ⅰ表达的作用(P＜0.01).加入JNK阻断剂SP600125后能够明显抑制自噬和凋亡,LC3B Ⅱ和Cleaved-Caspase3表达降低(P＜0.05),并阻断白藜芦醇抑制Col.Ⅰ表达的作用(P＜0.05).结论：白藜芦醇可以通过调控SIRT1和JNK通路诱导自噬,抑制HSC活化.
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