全反式维甲酸耐药急性早幼粒白血病细胞株靶向多肽的鉴定及肽体构建与表达

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目的:明确四种多肽及其相应肽体(Fc融合蛋白)与耐药细胞株的结合特异性。方法:根据前期筛选所获得噬菌体克隆展示多肽的序列,合成四种多肽,并利用流式细胞检测技术和免疫荧光技术鉴定四种多肽与耐药细胞株的结合特异性;利用p FUSE-h IgG2-Fc2质粒,并通过分子克隆技术构建重组质粒,转染至293-T工具细胞,表达双价展示多肽的Fc融合蛋白,超离浓缩后免疫磁珠纯化;利用流式细胞检测技术和免疫荧光技术鉴定Fc融合蛋白与耐药细胞株的结合特异性。结果:四种合成多肽与耐药细胞株均呈现特异性结合;成功构建26-p FUSE-h IgG2-Fc2/27-p FUSE-h IgG2-Fc2重组质粒,并成功表达26-Fc/27-Fc融合蛋白。结论:四种合成多肽及具有二价展示功能的相应Fc融合蛋白均具有良好的耐药细胞株靶向性,为临床检测急性早幼粒细胞白血病耐药发生奠定基础。
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