【摘 要】
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PM2.5 引起的健康危害日益受到广泛关注,但其确切的损伤机理仍不完全清楚,目前也缺乏有效拮抗PM2.5 损伤的天然活性物质.因此本文对北京市PM2.5 造成CHO 细胞的损伤作用及天然物质的拮抗作用进行研究,结果可为PM2.5 污染治理和疾病的预防提供科学依据.通过CCK-8 法测定细胞存活率；流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期；荧光探针DCFH-DA 法测定ROS；提取细胞内总蛋白并测定其中SO
【机 构】
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北京联合大学功能食品科学技术研究院 首都师范大学生命科学学院
【出 处】
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中国环境科学学会环境医学与健康分会2014年会暨环境与健康国际研讨会
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PM2.5 引起的健康危害日益受到广泛关注,但其确切的损伤机理仍不完全清楚,目前也缺乏有效拮抗PM2.5 损伤的天然活性物质.因此本文对北京市PM2.5 造成CHO 细胞的损伤作用及天然物质的拮抗作用进行研究,结果可为PM2.5 污染治理和疾病的预防提供科学依据.通过CCK-8 法测定细胞存活率；流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期；荧光探针DCFH-DA 法测定ROS；提取细胞内总蛋白并测定其中SOD 含量；彗星试验测定DNA 链断裂和微核试验测定微核形成率；Western Blotting 分别测定了p-akt/akt、p65、Bad、Rad51 和caspase-3的相对表达量.结果显示：(1)10～40 μg/mL 的PM2.5 可明显降低CHO 细胞存活率,并呈现极显著的剂量-效应关系(r=-0.964,p＜0.01)；15 μg/mL PM2.5 可以显著增加细胞凋亡、引起细胞内ROS 增加、SOD 含量下降、DNA 链断裂、微核率增加、细胞增殖指数降低、p-akt/akt、p65、p53 和caspase-3 的表达量明显增加.(2)20 μM 阿魏酸、50 μM 绿原酸和10 μM 荭草素预处理CHO 细胞6 h 后加入PM2.5 继续作用20 h,结果显示三种单体具有不同程度的拮抗PM2.5 引起的细胞增殖抑制、诱导细胞凋亡、增加细胞内ROS、降低SOD 含量、DNA 损伤、微核形成、影响细胞周期及上调p-akt/akt、p65、p53 和caspase-3 的作用.综合分析结果显示20 μM 阿魏酸的保护作用最佳.由此可见,PM2.5 引起的CHO 细胞损伤与细胞凋亡与Akt 和NF-κB 通路的激活有关；三种天然活性物质具有拮抗PM2.5 造成的细胞损伤的能力,其保护机理是通过其降低PM2.5 引起的细胞内氧化应激,进而降低被PM2.5 激活的Akt 通路与NF-κB 通路和下调Bad 蛋白表达量来实现的.
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