日本鳗鲡肝脏抗菌肽的分离纯化

来源 :中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouyonge
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  本试验应用超声波破碎细胞、醋酸粗提,加热,离子交换及反相高效液相色谱(HPLC)等技术,对日本鳗鲡肝脏抗菌肽进行了粗提、分离和纯化.用混合平板打孔法和微量反应96微孔法检测抗菌活性;用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳检测HPLC分离的抗菌肽纯度并初步确定目的蛋白的分子量;最后应用质谱仪测定抗菌肽分子量.结果表明:日本鳗鲡肝脏的酸性粗提物对迟缓爱德华氏菌B09、气单胞菌B18、嗜水气单胞菌B27均具有很强的抗菌活性;加热后抗菌活性不但没有丢失,反而有所提高;经离子交换和HPLC纯化,抗菌肽对细菌的抗菌作用有一定的选择性,同时从日本鳗鲡肝脏分离纯化得到一种新型抗菌肽;进一步质谱仪测定抗菌肤分子量,抗菌活性峰分子质量为2388.05道尔顿.结论:在日本鳗鲡肝脏内存在大量抗菌活性物质,并具有一定的耐热能力;该项实验分离纯化得到一种新型抗菌肽,该抗菌肽对B09、B18具有一定的抗菌活性;建立了日本鳗肝脏抗菌肽的分离纯化的方法,为鳗鲡的病害防治开辟新途径,为研究和开发新型抗菌蛋白/肽药物积累基础数据.
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