论文部分内容阅读
背景：脂肪源性干细胞(Adipose-derived stromal vascular fraction /stem cells,SVF/ADSCs)作为成体干细胞家族的新成员因具有来源丰富、取材容易、增殖迅速、多项分化潜能、低免疫原性和免疫调节作用,在再生医学领域展现了广阔的应用前景.但如何提高其临床治疗效果是目前干细胞临床转化应用研究中的热点问题.目的：本实验通过观察镓铝砷激光(GaAIAs laser)对ADSC增殖、细胞因子分泌及成脂分化能力的影响,探讨临床治疗过程中提高ADSC治疗效果安全、有效的方法.方法：取来自腹部脂肪抽吸术女性患者的脂肪组织,分离ADSCs,建立hADSCs培养体系；用波长650nmGaAIAs激光2J/cm2,4J/cm2,8J/cm2对ADSC进行照射.利用XTT法检测ADSC的增殖能力；ELISA法检测ADSC的分泌功能；实时定量PCR法检测细胞表型的变化；油红染色检测激光照射对ADSC成脂分化能力的影响.结果：研究使用细胞为2-3代,经波长650nm不同能量GaAIAs激光(2 J/cm2,4 J/cm2,8 J/cm2)照射,MTT法检测结果显示：第4、6天能量为2J/ cm2时照射组吸光度与对照组吸光度无明显差异(p＞0.05)；能量为4J/ cm2、8J/ cm2时照射组吸光度与对照组吸光度差异显著(p＜0.05)；其中照射能量为4J/ cm2时吸光度差异最为明显.ELISA法检测结果显示：能量为4J/m2的GaAIAs激光照组hADSC的细胞上清液中VEGF、PDGF、TGF-β的蛋白含量分别为287.451±15.188、35.988±0.696、292.571±10.535；空白对照组蛋白含量分别为145.294±21.613、26.672±0.583、130.579±6.007,两者之间相比较差别明显(p＜0.05).根据荧光定量PCR检测结果显示：经4 J/cm2照射后hADSCs中细胞表型CD13、CD29、CD44、CD90 mRNA相对表达量分别为对照组的1.19、22.05、4.38、7.22倍,两组间差异显著(P＜0.05).油红染色显示经GaAIAs照射处理后hADSCs的成脂分化能力明显高于空白对照组.结论：低能量激光治疗可增强ADSC的增殖、分泌及成脂分化能力,这也许有助于提高脂肪千细胞临床转化应用的治疗效果,是一种简便、安全、有效的方法.