论文部分内容阅读
T-2毒素是单端孢霉烯族化合物中毒性最强的毒素之一,亦是饲料及粮食发生污染的主要毒素之一,但其毒性分子机理仍不清楚.采用蛋白组学的方法研究发现T-2毒素响应蛋白主要定位于线粒体中,占差异蛋白总数的34％;这些蛋白主要参与了氧化还原调控、转录和翻译调控、细胞周期和细胞增殖、脂代谢、物质转运、蛋白降解和逆境应激等途径.进一步研究发现T-2毒素处理后，鸡原代肝细胞内活性氧大量聚集，导致细胞DNA损伤和诱导细胞凋亡。同时，T-2毒素可诱导线粒体数目的增加与细胞内ATP含量的升高。提示T-2毒素一方面通过诱导活性氧等引起细胞的DNA损伤，从而导致癌症和神经疾病等;另一方面，细胞可通过代偿性的线粒体增生，产生更多的ATP用于活性氧的清除、细胞凋亡和信号传导等，从而减轻T-2毒素对细胞的损伤。基于T-2毒素处理后基因和蛋白表达谱的变化，发现猪CYP3A22,3A46,CES1C5(羧酸酯酶)和EPHX1(环氧化物水解酶)可能分别参与T-2毒素的轻化、水解和脱环氧反应。体外生化实验进一步证实CYP3A22和CYP3A46催化T-2毒素或HT-2毒素(T-2毒素水解产物)生成3-OH-T-2或3-OH-HT-2。其中CYP3A22主要催化HT-2毒素代谢生成3-OH-HT-2, CYP3A46主要催化T-2毒素代谢生成3-OH-T-2。以鸡原代肝细胞为研究对象，通过酶抑制剂和荧光定量PCR筛选鉴定了鸡体内参与T-2毒素代谢的候选基因，体外生化分析发现真核与原核重组表达的鸡CYP1A5均可显著催化T-2毒素发生轻化代谢，生成3-OH-T-2。而猪体内参与T-2毒素轻化代谢的酶主要是CYP3A家族，提示T-2毒素在畜禽体内代谢存在种属差异。以上研究成果为T-2毒素防控和减毒提供了重要理论参考。