【摘 要】
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目的：探讨成骨细胞中PKC蛋白通路对单轴向周期牵张应力效应及对增殖的影响，为阐明影响细胞生长、因子的转录以及成骨相关基质蛋白的表达做铺垫，为骨组织工程和临床治疗提供新的理论依据。方法：取新生第3日龄SD无菌级大鼠无菌操作取颅盖骨，除粘附的骨膜、血管和结缔组织，进行成骨细胞培养；将培养的成脊细胞用PBS缓冲液冲洗，加入中性福尔马林液固定细胞，然后用三蒸水冲洗干净。以碱性磷酸醉试剂盒使用说明进行碱性磷
【机 构】
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天津医科大学总医院骨科 300052
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目的：探讨成骨细胞中PKC蛋白通路对单轴向周期牵张应力效应及对增殖的影响，为阐明影响细胞生长、因子的转录以及成骨相关基质蛋白的表达做铺垫，为骨组织工程和临床治疗提供新的理论依据。方法：取新生第3日龄SD无菌级大鼠无菌操作取颅盖骨，除粘附的骨膜、血管和结缔组织，进行成骨细胞培养；将培养的成脊细胞用PBS缓冲液冲洗，加入中性福尔马林液固定细胞，然后用三蒸水冲洗干净。以碱性磷酸醉试剂盒使用说明进行碱性磷酸醉组织化学染色；取第三代生长良好的大鼠成骨细胞，胰醉消化后散，细胞计数后调整浓度至2×10-5/ml，加入弹性基底膜培养，标准环境下以10%FBS的DMEM培养液孵育24h。结果：第3代传代细胞呈长梭形、多角形细胞培养5-7d细胞融合成单层，S期细胞数量增加，周期性牵张应力上调大鼠成骨细胞中表达及促使PRC磷酸化结论：PKC蛋白通路参与感知成骨细胞的力学信号转导，并促进细胞增殖，是细胞力学信号传导通路中重要的环节。
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