【摘 要】
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目的:通过建立猪腰椎间盘软骨终板细胞的培养模型,并施加NO,探讨NO对软骨终板细胞代谢及凋亡的影响.方法:取长枫杂交猪腰椎间盘软骨终板细胞,于20%胎牛血清的DMEM培养基中培养,建立体外软骨终板细胞培养模型,以光镜及HE染色观察其生物学表现,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色对软骨终板细胞进行鉴定;以2mmol/L硝普钠(SNP)处理软骨终板细胞,35S和3H-脯氨酸掺入法检测蛋白多糖及胶原的合成,放射性
【机 构】
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广东省广州市天河路600号,中山大学附属第三医院骨科,510630
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目的:通过建立猪腰椎间盘软骨终板细胞的培养模型,并施加NO,探讨NO对软骨终板细胞代谢及凋亡的影响.
方法:取长枫杂交猪腰椎间盘软骨终板细胞,于20%胎牛血清的DMEM培养基中培养,建立体外软骨终板细胞培养模型,以光镜及HE染色观察其生物学表现,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色对软骨终板细胞进行鉴定;以2mmol/L硝普钠(SNP)处理软骨终板细胞,35S和3H-脯氨酸掺入法检测蛋白多糖及胶原的合成,放射性免疫测定法测炎性细胞因子的生成,碘化丙啶(PI)荧光染色观察软骨终板细胞凋亡.
结果:原代细胞生物学性状最接近体内细胞,多次传代后细胞呈现衰老现象.经染色证实此细胞具有Ⅱ型胶原表达.施加SNP后,软骨终板细胞蛋白多糖及胶原合成明显减少(P<0.01),炎性细胞因子含量明显升高(P<0.01),细胞凋亡率显著增高(P<0.01).
结论:NO抑制软骨终板细胞蛋白
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