【摘 要】
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目的：本研究探讨了microRNA 291b 在TNF-ɑ抑制肝细胞糖原合成中作用.首先,利用TNF-ɑ建立肝脏胰岛素抵抗模型,检测microRNA 291b表达改变；其次,转染人工合成的microRNA 291b的模拟物(包括mmics和inhibitor),进一步探讨microRNA 291b对肝细胞糖原合成和胰岛素信号通路的影响.方法：1.用10ng/mL TNF-ɑ处理小鼠肝细胞系NCTC
【机 构】
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北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验 北京100730
【出 处】
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第六届中国老年健康论坛暨首届健康产业峰会
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目的：本研究探讨了microRNA 291b 在TNF-ɑ抑制肝细胞糖原合成中作用.首先,利用TNF-ɑ建立肝脏胰岛素抵抗模型,检测microRNA 291b表达改变；其次,转染人工合成的microRNA 291b的模拟物(包括mmics和inhibitor),进一步探讨microRNA 291b对肝细胞糖原合成和胰岛素信号通路的影响.方法：1.用10ng/mL TNF-ɑ处理小鼠肝细胞系NCTC1469,建立肝脏胰岛素抵抗模型,确定在该模型中肝糖原合成减少；并利用10ng/mL TNF-ɑ处理小鼠原代肝细胞,建立肝脏胰岛素抵抗模型,确定该模型中肝糖原合成的变化；2.利用q-PCR方法检测该模型中microRNA 291b表达的改变；3.在NCTC1469细胞中转染化学合成的microRNA 291b mimics,观察过表达microRNA 291b对肝糖原合成的影响.4.利用生物信息学软件分析microRNA 291b下游基因； 5.利用western blot方法进一步确定microRNA 291b对下游基因表达的影响.结果：1.TNF-ɑ处理小鼠肝细胞系NCTC1469及小鼠肝原代细胞24h,能够建立肝脏胰岛抵抗模型.在该模型中肝细胞糖原合成减少,胰岛素信号通路受损.2.在该模型中microRNA 291b表达明显升高.3.在NCTC1469中转染化学合成的microRNA 291b inhititor能够明显促进肝细胞糖原合成,增强胰岛素信号通路；4.在NCTC1469中转染化学合成的microRNA 291b mmics能够明显引起Pten蛋白表达升高,抑制肝糖原合成,促进胰岛素抵抗.结论：TNF-ɑ能够升高microRNA 291b表达,从而减少肝脏糖原合成,抑制胰岛素信号通路.microRNA 291b可能通过升高Pten蛋白水平从而引起胰岛素抵抗.
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