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根据OToole和Kolter建立的方法改进,过夜培养的AhJ-1平板计数,计数后用PBS稀释成16个稀释度。从每个稀释度取200μL用1%(w/v)结晶紫染色20 min,离心洗涤3次,自然晾干,90%乙醇萃取结晶紫,测A590吸光值。建立细菌数对数与吸光值之间的线性关系。同样方法染色生物被膜,测A590吸光值。根据标准曲线计算相应的细菌数,该细菌数可视为形成生物被膜的细菌数量,建立用生物被膜含细菌数量估算生物被膜的方法。同时用显微镜和扫描电镜进行AhBF的定性分析,结果显示所建立的结晶紫染色方法可估算生物被膜的量。利用此估算法从培养基和介质两方面研究了生物被膜产生的影响条件。结果显示MM9和Mg+LB能促进嗜水气单胞菌生物被膜的形成,并且Mg2+只在一定浓度范围内促进BF的形成,而LB+MOPS和3LB+Glucose两培养基则抑制其形成。表面粗糙的甲壳素较聚苯乙烯更有利于BF的形成。