重组人乳头瘤病毒16型L1 VLP的初纯化、鉴定及免疫效果的初步研究

来源 :第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oncecao
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目的:对昆虫细胞-杆状病毒系统表达的HPV16 L1 VLP进行初步的纯化研究,并用纯化的VLP颗粒免疫小鼠检测其免疫原性。 方法:采用蔗糖-氯化铯超速离心纯化工艺纯化HPV16 L1 VLP,纯化得到的VLP分别进行Western-blot、SDS-PAGE及电镜鉴定,然后免疫BALB/c小鼠。6周龄BALB/c小鼠随机分六组,包括三组剂量组,两组佐剂组和一组对照组。免疫三次,分别于2周和4周后各加强免疫一次,剂量与首次相同。取血分离血清,ELISA法检测HPV16 L1 VLP的抗体滴度。 结果:采用蔗糖-氯化铯超速离心纯化工艺,SDS-PAGE鉴定纯化得到的HPV16 L1 VLP纯度可达到90%,电镜观察可见完整VLP颗粒。ELISA结果显示各试验组小鼠血清中均可检测到HPV16 L1 VLP的特异性抗体,并且具有针次间差别和剂量反应性。 结论:采用蔗糖-氯化铯超速离心纯化法得到的HPV16 L1VLP可用于免疫学的初步研究,证明通过昆虫细胞表达产生的HPV16 L1 VLP具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强的体液免疫应答。
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