猪瘟病毒E2基因原核表达的研究

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  根据GeneBank已发表的猪瘟E2基因序列,设计合成l对特异性引物,通过RT-PCR技术从病料中扩增出E2基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体上。经测序正确后,并将目的基因亚克隆到pET-32a(+)载体后,经双酶切和序列测定结果表明:猪瘟E2基因原核表达载体pET-32a-E2构建成功;在此基础上将重组表达质粒转化至宿主茵BL21中,诱导表达蛋白。通过对诱导表达蛋白的SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析,得到了约58KD左右的表达蛋白,与预期大小相符,表明猪瘟E2基因在大肠杆菌中能高效表达,并具有一定的生物学活性。
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