GFP-PTS1与GFP-PTS2融合蛋白表达载体的构建与稻瘟病菌转化子的共聚焦分析

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分别扩增 GFP 与过氧化物酶体定位信号的融合基因 GFP-PTS1和 GFP-PTS2,并构建 GFP、GFP-PTS1与 GFP-PTS2的双元表达载体,转化稻瘟病菌,筛选单拷贝插入转化子,在共聚焦显微镜下观测。结果显示,GFP-PTS1 与 GFP-PTS2转化子细胞中荧光呈点状,多位于细胞周围,而不含 PTS 的 GFP 转化子中荧光均匀分散于细胞质,表明 GFP-PTS1与 GFP-PTS2可以定位到过氧化物酶体。在相同条件下,GFP-PTS2转化子的荧光背景高于 GFP-PTS1;孢子中荧光点的密度高于菌丝中。本研究为稻瘟病菌过氧化物酶体动态变化与相关基因研究以及特异性药物筛选提供了基础和手段。
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