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目的:本研究探讨大肠杆菌QseC在肠道细菌移位引发生物材料植入感染中的作用;揭示防治大肠杆菌引发的生物材料植入感染的有效分子药物靶标,为防治生物材料植入感染提供实验依据.方法:1、应用Red同源重组技术构建大肠杆菌qseC阴性突变菌株:选用大肠杆菌K-12 MC1000菌株为研究对象,应用PCR技术扩增两翼与目的基因上下游同源、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化入大肠杆菌MC1000.在阿拉伯糖诱导下,含有质粒pKD46的菌株MC1000表达Red同源重组酶,利用含同源臂的氯霉素抗性片段置换目的基因qseC,并进一步利用FLP位点专一性重组将氯霉素抗性基因删除.最后用鉴定引物行PCR对大肠杆菌qseC阴性突变菌株进行鉴定,标记为MC1000ΔqseC.2、大肠杆菌QseC 在细菌生物学表型变化中的作用:测定大肠杆菌MC1000和MC1000ΔqseC 的生长曲线,及其在泳动能力检测培养基上的运动能力.探讨大肠杆菌QseC在细菌生物学表型变化中的作用.结果:1、大肠杆菌qseC阴性突变菌株的构建:PCR及DNA测序结果表明,qseC基因内部序列已被删除,且无氯霉素抗性基因,qseC基因已被成功敲除.2、大肠杆菌QseC在细菌生物学表型变化中的作用:①MC1000和MC1000ΔqseC在LB培养基中的生长并无明显差异;②MC1000和MC1000ΔqseC在LBEPI(或LBNE)培养基中的生长并无明显差异;③相对于MC1000菌株,MC1000ΔqseC突变株的运动能力明显下降(P＜0.05).MC1000菌株在LBEPI和LBNE培养基中的运动力较之在LB培养基中明显增强(P＜0.05),而当存在EPI 或NE时MC1000ΔqseC突变株的变化无统计学意义(P＜0.05).结论:1、大肠杆菌qseC基因缺陷株(MC1000ΔqseC)已成功构建.2、突变菌株(MC1000ΔqseC)运动能力显著下降.肾上腺素或去甲肾上腺素对大肠杆菌MC1000运动能力有直接促进作用,而且该作用是通过qseC介导的.3、PVC材料表面大肠杆菌生物膜的形成是一个动态过程,PVC材料表面细菌群落数量及细菌生物膜厚度的增加与时间的变化有关,可能与生物材料植入感染的临床感染特征有关.