[目的]喹乙醇因具有良好的抗菌促生长的作用,被广泛用于饲料添加剂。但其具有明显的蓄积毒性和DNA损伤等副作用,对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的致畸、致突变和致癌危害,因此喹乙醇已被许多国家禁用。本研究旨在探讨喹乙醇诱导的肝损伤中p53与氧化应激的相互作用及在体内体外的毒性分子机制。[方法]本研究选用p53基因敲除小鼠(C57BL/6),p53基因缺失细胞系(HCT116)。将小鼠分为4组(n=10)设对照组、p53缺失组,喹乙醇400mg/kg组,p53缺失组+喹乙醇400 mg/kg组,所有小鼠连续灌胃28天,麻醉处死后收集小鼠血液及肝脏组织。试剂盒检测氧化应激标志物(MDA、CAT和SOD),Western blot检测信号通路标志性蛋白变化。噻唑蓝(MTT)法检测细胞成活率;AnnexinV-PI和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;荧光探针2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测活性氧(ROS)的产生,罗丹明(Rhodamin 123)染色检测线粒体膜电位,荧光显微镜观察分析。[结果]研究结果表明,喹乙醇通过引起氧化应激和激活p53通路诱导肝损伤。同时,N-乙酰半胱氨酸(NAC)在体内和体外显著降低了喹乙醇诱导的氧化应激、ROS的产生和p53蛋白的表达。p53敲除可明显降低喹乙醇诱导的肝损伤和氧化应激,同时抑制HCT116和HepG2细胞凋亡。此外,p53敲除缓解线粒体膜电位(MMP)降低和抑制线粒体凋亡通路。喹乙醇诱导MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路显著激活,而在p53缺失小鼠和p53缺失细胞中MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路明显抑制,而LC3和Beclin1的表达进一步增加。[结论]我们的研究结果提供了一个结论,p53在喹乙醇诱导的肝损伤与氧化应激主要发挥了促凋亡的作用,这在很大程度上依赖于抑制ROS的产生和Nrf2/HO-1通路,并通过激活LC3和Beclin1上调自噬途径的,从而抑制喹乙醇诱导MAPK和AKT信号通路。