烟草烟雾凝集物在BEAS-2B细胞中线粒体凋亡的作用

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目的:研究烟草烟雾凝集物(cigarette smoke condensate,CSC)对永生人支气管上皮细胞(immortalized human bronchial epithelial,BEAS-2B)线粒体凋亡的影响。方法:培养细胞融合至70%左右,用CSC染毒24小时。设立二甲基亚砜(Dimethyl Sulfoxide,DMSO)溶剂对照、正常BEAS-2B细胞组和0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL和0.08mg/mLCSC染毒组,通过Western blot、RT-qPCR和细胞流式技术检测线粒体电位变化情况、各组相关基因与蛋白的表达和细胞凋亡率。结果:随着CSC染毒浓度的提高,在激光共聚焦显微镜下细胞内红绿荧光比明显下降。各CSC染毒组的Bax、Cyt-C和caspase-3基因表达量均高于空白对照组、DMSO组,差异均有统计学意义(P<0.001)。而Bcl-2基因的表达量均低于空白对照组、DMSO组(P<0.001)。各CSC染毒组的Bcl-2蛋白表达量低于DMSO组(P<0.001),各CSC染毒组Bax和caspase-3蛋白表达量均高于DMSO组(P<0.001)。各CSC染毒组的细胞凋亡率均大于对照组和DMSO组,各CSC染毒组之间的细胞凋亡率有统计学差异(P<0.05)。结论:线粒体在CSC的作用下导致线粒体膜电位下降,最终诱导线粒体介导的凋亡途径发生。
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