异基因骨髓间充质干细胞移植对胶原诱导关节炎大鼠血清多种细胞因子的影响

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:zhongnanhai10mg
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目的:观察BMSCs移植对胶原诱导关节炎(CIA)大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-17、RANKL、OPG、RANTES、MCP-1、IP-10、VEGF的影响,探讨BMSCs免疫调节作用的机制。方法:1.体外分离、培养Wistar大鼠BMSCs,流式细胞术检测表面抗原CD44、CD105、CD29、CD34、CD45、CD31;BMSCs分化为成骨细胞、脂肪细胞的鉴定。2.实验分组:CIA早期对照组、CIA晚期对照组、BMSCs早期干预组、BMSCs晚期干预组、MTX干预组、空白对照组,每组8只。3.给药方法:按1×107/kg/鼠计算,将适量BMSCs注到大鼠体内,MTX为按0.9mg/kg给药,1次/周。4.检测指标:42d时,流式多因子检测技术检测外周血中TNF-α、IL-6、IL-17、RANKL、OPG、MCP-1、RANTES、IP-10、VEGF的表达水平,收集数据做统计分析。结果:1.经流式细胞术检测:CD44、CD105、CD29阳性,CD45、CD34、CD31阴性。BMSCs诱导成骨、成脂分化能力强。按照间充质干细胞国际标准,证实获得的细胞为BMSCs。2.CIA模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6、RANKL、RANTES、MCP-1、IP-10、VEGF水平明显较空白对照组升高,P<0.05;IL-17a、OPG在CIA模型组与空白对照组间比较差异无统计学意,P>0.05。3.与CIA模型组比较,MTX治疗组大鼠血清中TNF-α、IL-6、RANKL、RANTES、MCP-1、IP-10水平明显下降,P<0.05。MTX治疗组VEGF下降不明显,与CIA模型组比较P>0.05。4.早期BMSCs治疗组较早期CIA模型组TNF-α、IL-6明显降低,P<0.05;晚期BMSCs治疗组较晚期CIA模型组TNF-α、IL-6明显下降,P<0.05;早期BMSCs治疗组与MTX治疗组比较TNF-α、IL-6水平接近,差异无统计学意义P>0.05;晚期BMSCs治疗组TNF-α、IL-6水平也有下降趋势,但较MTX治疗组下降不明显,P>0.05。5.早期BMSCs治疗组较早期CIA模型组RANTES、IP-10明显下降,P<0.05,但晚期BMSCs治疗组与晚期CIA模型组比较RANTES、IP-10差别无统计学意义,P>0.05;早期BMSCs治疗组较晚期BMSCs治疗组RANTES、IP-10下降更明显,P>0.05;MTX治疗组与早期BMSCs治疗组、晚期BMSCs治疗组的RANTES、IP-10均无统计学差别,P>0.05。6.早期BMSCs治疗组较早期CIA模型组MCP-1明显下降,P<0.05,但晚期BMSCs治疗组与CIA模型组比较RANTES差别无统计学意义,P>0.05;早期BMSCs治疗组较晚期BMSCs治疗组MCP-1下降更明显,差别有统计学意义P<0.05;MTX治疗组与早期BMSCs治疗组MCP-1水平无统计学差别P>0.05,晚期BMSCs治疗组与MTX治疗组比较MCP-1水平有统计学差异,P<0.05。结论:1.CIA大鼠中存在免疫功能紊乱,血清中TNF-α、IL-6、RANKL、RANTES、MCP-1、IP-10、VEGF水平明显升高。2.BMSCs可通过抑制血清中TNF-α、IL-6、RANTES、MCP-1、IP-10水平而发挥免疫调节作用。3.BMSCs干预CIA大鼠早期比晚期疗效好。
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