【摘 要】
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本试验的目的是探讨LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)3种转染试剂对睾丸网注射生产转基因小鼠效率的影响.将pEGFP-C1质粒分别与不同转染试剂混合后注入小鼠睾丸网内,30 d后检测小鼠精子密度、活力、睾丸EGFP表达和精子阳性率以及配种后仔鼠转基因阳性率.结果显示,3种不同脂质体对小鼠生精功能影
【机 构】
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上海农业科学院畜牧兽医研究所,上海201106;上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室,上海201106;四川农业大学动物科技学院,雅安625014
【出 处】
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上海市畜牧兽医学会2013年学术年会
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本试验的目的是探讨LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)3种转染试剂对睾丸网注射生产转基因小鼠效率的影响.将pEGFP-C1质粒分别与不同转染试剂混合后注入小鼠睾丸网内,30 d后检测小鼠精子密度、活力、睾丸EGFP表达和精子阳性率以及配种后仔鼠转基因阳性率.结果显示,3种不同脂质体对小鼠生精功能影响由小到大依次为LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine2000和PAMAM-D.荧光检测小鼠睾丸,三组均有荧光表达.荧光显微镜下三个处理组小鼠精子阳性率分别为35.65±0.69％、12.86±0.35％和10.04±±0.20％.PCR检测转基因仔鼠,三者的转基因效率分别为29.17％、13.70％和5.88％.部分PCR阳性小鼠脚趾和尾巴在荧光显微镜下呈绿色荧光表达.试验结果表明,LipofectamineTM LTX&PLUSTM毒性小,并可有效的介导外源基因在体内转染小鼠生精细胞,可用于睾丸网注射生产转基因小鼠.
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