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为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV-1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明能同时扩增得到2条与试验设计相符的311 bp(IBRV)和392 bp(AKAV)特异性条带;IBRV的灵敏度为0.13 pg/25μL,AKAV的灵敏度为1.04 pg/25μL.本试验方法的建立对于加强进出口牛IBRV和AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。