研究背景:环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cy or CTX)是一种常用的细胞毒化疗药物,同时也是一种免疫抑制剂,常用于自身免疫性疾病等的治疗;其作用机制为与DNA发生交叉联结,抑制DNA的合成,也干扰RNA的功能,属细胞周期非特异性药物。Cy还能作为免疫增强剂使用,加速非肥胖性小鼠自身免疫性糖尿病的发生,也有报道能增强抗肿瘤免疫治疗效果。因此,这些现象提示在合适的条件下Cy能起到免疫增强剂的作用,但其内在的机理目前尚未研究清楚。淋巴细胞是机体执行免疫效应的主要细胞,其数量、亚群和功能的变化是机体免疫状态的直观体现。利用Cy制备免疫低下动物模型是科研工作中常用手段,但实际应用中常难以出现均一性良好的结果。目的:研究Cy在不同剂量、不同作用时间对小鼠免疫功能的影响及其可能的作用机制,为常规Cy制备免疫低下动物模型提供参考依据。方法:连续多次腹腔注射不同剂量(0、15、30、60mg/kg)的Cy,于不同作用时间(4、7、10、13、16、19天)分别观察其对小鼠体重、生存期、脾脏指数、外周血淋巴细胞总数及其各亚群的构成比改变和脾脏淋巴细胞的相关功能变化,探讨其对小鼠免疫功能的影响和可能机理。结果:使用Cy后从第4天始外周血和脾脏中粒细胞、单核细胞数量出现了迅速而显著地下降,致淋巴细胞比例出现相对性增高,同时淋巴细胞亚群构成也发生明显改变:出现非T淋巴细胞比例的急剧下降和T淋巴细胞比例的显著升高,且以CD3~+CD4~+的辅助性T细胞较CD3~+CD8~+的细胞毒性T淋巴细胞比例升高更显著;脾脏淋巴细胞在终浓度5μtg/ml的ConA48h刺激下,镜下显示随着Cy用药浓度增大和时间延长,淋巴细胞分裂增殖能力减弱,数量减少,并出现多伪足现象;PI染色显示对应组淋巴细胞周期阻滞,细胞死亡和碎片增多。体重监测和脾脏指数显示Cy组平均体重和脾指数整体水平低于盐水对照组,不同剂量组体重变化趋势不一,低剂量组与对照组体重和脾脏指数变化趋势基本一致,差异无显著性;中剂量组呈起伏上升状,实验初期先下降,至第10天后扭转为直线上升,死亡率11.11%;高剂量组变化整体趋势较平缓,持续处于低谷,仅第13天后略有上升,但很快生存期也结束,死亡率22.22%。结论:Cy对昆明小鼠整体免疫功能具有全面抑制效应,以天然免疫细胞最先受损,T淋巴细胞尤其CD3~+CD4~+的辅助性T淋巴细胞数量减少相对滞后,目免疫细胞数量和亚群的变化同免疫损伤程度相关。