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目的:建立高效毛细管电泳法测定红枣中cAMP和cGMP含量。
方法:用未涂层熔融毛细管柱50 cm×50 μ m,有效分离长度40cm;20mmol/L磷酸盐缓冲液(K2HPO4-KH2PO4),pH9.8为介质;操作电压19 Kv;柱温:20℃;检测波长:254nm;p-ABA为内标物。
结果:cAMP和cGMP分别在2~650mg/L,2~600mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r>0.998);平均回收率为95.8％,96.2％;RSD分别为2.12％,2.43％。
结论:高效毛细管电泳法可用于测定红枣中cAMP和cGMP含量环腺苷酸(Cyclie Adenosine-3’,5’monophate,简称cAMP)和环鸟苷酸(Cyclic Guanosine-3’,5’-monophate,简称cGMP)合称为环核苷酸,为当今分子生物学研究的重要内容之一。
cAMP为蛋白激酶致活剂,是细胞内传递激素和递质作用的中介因子,作为第二信使参与多种生理生化过程的调节,能舒张平滑肌、扩张血管、改善肝功能,对心肌梗塞、冠心病、心源性休克、牛皮癣等疾病有显著疗效。cGMP是cAMP的拮抗物,它们一起调节细胞的生长、发育等重要过程,并在分子免疫反应、恶性疾病的转变过程中起着重要作用[1]。红枣中含有50多种化学物质，包括有多糖、蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素A、B1、B2、C、E、P，有机酸和包括硒在内36种微量元素，美味可口，营养丰富。常用于中药，具有补血、健脑、抗癌及健脾强身等功效，《神农本草经》中列为上品，历代本草中均有收载[2]。K Hanabusa等报道了大枣中cAMP的含量在高等植物中是最高的，是鳄梨含量10倍以上[3]。目前，国内对大枣中cAMP的研究仅限于高效液相色谱法、竞争蛋白法等，未见高效毛细管电泳法测大枣中cAMP和cGMP含量研究的相关报道。本文旨在建立一种灵敏度高、快速、简单的红枣环核苷酸测定方法。