论文部分内容阅读
研究背景:对乙酰氨基酚是解热镇痛常用的一种非处方药,但该药过量使用会导致急性肝脏衰竭,严重时会导致死亡。对乙酰氨基酚过量直接介导的肝实质细胞坏死只是占整个肝脏损伤的一部分,而肝实质细胞坏死后活化的天然免疫应答是造成肝脏损伤的重要原因。研究目的 :在对乙酰氨基酚诱导的肝脏损伤中,中性粒细胞被发现参与其中,但中性粒细胞是如何浸润到肝脏以及触发了此反应的起因和过程到目前还没有研究清楚。研究方法 :我们用过量的对乙酰氨基酚处理小鼠,诱导出肝脏的急性损伤,通过病理学染色和谷丙转氨酶水平检测确定肝脏的损伤水平,通过流式细胞术和细胞计数的方法确定肝脏中各种免疫细胞的变化,通过酶联免疫吸附法确定细胞因子的变化,通过细胞清除和细胞因子中和的方法确定它们在体内的功能,同时也通过体外的细胞培养刺激确定细胞的特性变化。研究结果 :过量的对乙酰氨基酚处理会使肝脏中性粒细胞显著增加且肝脏发生严重损伤。同时对乙酰氨基酚处理后的血清中和肝脏组织中IL-17A和IL-23显著增加。阻断IL-17A或IL-23可以减轻中性粒细胞的浸润和肝脏损伤,阻断IL-23则减少血清中IL-17A。流式检测发现,肝脏中IL-17A+γδT细胞的比例增加。清除γδT细胞则会减少IL-17A,而清除CD4+T细胞和NK1.1+细胞却没有降低IL-17A的水平。IL-23体外单独刺激就可以诱导γδT细胞产生IL-17A。但抑制巨噬细胞的活性则明显降低IL-23和IL-17A的水平。对乙酰氨基酚处理导致HMGB1显著增加,抑制HMGB1的作用会减少IL-23和IL-17A。体外用HMGB1刺激TLR4+/+巨噬细胞可以使其产生IL-23,而TLR4-/-巨噬细胞产生的IL-23却较少。对乙酰氨基酚处理的TLR4-/-小鼠其血清中的IL-23和IL-17A的含量也显著低于C57BL/6小鼠中的含量。结论 :对乙酰氨基酚引起肝实质细胞坏死,释放的HMGB1刺激巨噬细胞分泌IL-23,IL-23诱导γδT细胞产生IL-17A,IL-17A招募中性粒细胞浸润到肝脏中加重肝脏损伤。HMGB1-TLR4-IL-23-IL17A级联反应对中性粒细胞的浸润起到了关键性作用。