【摘 要】
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目的研究纳米硫化镉粒子(nCds)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)膜的损伤作用。方法将nCds配置成不同浓度,超声波震荡24h呈悬浊液状态后高压灭菌。不同浓度nCds作用于细胞24h后
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院卫生毒理学系现代毒理学教育部重点实验室;
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目的研究纳米硫化镉粒子(nCds)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)膜的损伤作用。方法将nCds配置成不同浓度,超声波震荡24h呈悬浊液状态后高压灭菌。不同浓度nCds作用于细胞24h后,分别采用CCK8与乳酸脱氢酶释放试验检测nCds对NRK-52E细胞生长的影响。采用双嵌入剂乙锭均二聚物(EthD-1)和钙黄绿素(CalceinAM)对细胞进行双染色后,荧光显微镜观察全体细胞的细胞膜损伤情况;采用激光共聚焦显微镜荧光染色观察单个细胞膜损伤情况;透射电子显微镜观察定位nCds进入细胞内的部位。结果nCds抑制NRK-52E细胞的生长,IC50值约为23μg/ml。EthD-1/CalceinAM双染色观察结果显示在10μg/ml nCds作用下细胞膜破损的细胞数与对照组相比明显增多且差异具有统计学意义。激光共聚焦结果显示随着nCds的剂量增加,细胞膜的荧光强度降低,且在10μg/ml剂量下观察到细胞核破碎情况出现。透射电子显微镜显示,对照组细胞结构完整,细胞膜平滑有少量胞质凸起;10μg/ml剂量组中,细胞周围可见大量nCds颗粒,细胞整体结构尚完整,nCds颗粒进入到细胞质内,同时观察到细胞膜有破损情况出现,且细胞膜上可见nCds沉积。结论纳米硫化镉抑制大鼠肾小管上皮细胞的生长,能通过破坏细胞膜的方式进入到细胞质中,对细胞膜造成一定的损伤,进而导致细胞的死亡;对膜结构损伤的机制及分子的影响,有待进一步研究。
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