【摘 要】
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目的：探讨嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)激活后对体外受损的脊髓神经元的促再生作用以及可能的分子调控机制。方法：采用原代培养的方法分离培养、纯化成年小鼠OECs,接着在其培养体系中加入终浓度分别为1μg/ml LPS和2μM姜黄素(Curcumin,CCM),作用4天后,应用RT-PCR、Western-blot、免疫细胞化学染色,Brdu参入,流式细胞
【机 构】
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西安交通大学附属红会医院转化医学中心 西安交通大学附属红会医院脊柱外科
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的：探讨嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)激活后对体外受损的脊髓神经元的促再生作用以及可能的分子调控机制。方法：采用原代培养的方法分离培养、纯化成年小鼠OECs,接着在其培养体系中加入终浓度分别为1μg/ml LPS和2μM姜黄素(Curcumin,CCM),作用4天后,应用RT-PCR、Western-blot、免疫细胞化学染色,Brdu参入,流式细胞术及MTT等方法检测OECs中CXCL1、CXCL2、TGFα 以及Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)表达的情况,并进一步观察OECs增殖的情况。与此同时平行地在LPS和CCM预干预的OECs培养体系中加入退变受损的神经细胞碎片,接着在显微镜下观察OECs吞噬和清除神经细胞碎片的情况,并对吞噬细胞碎片进行定量分析。进一步采用联合培养的方法,将事先用LPS和CCM干预培养在盖玻片上的OECs加到体外损伤神经元模型的中进行联合培养。联合培养3、5、7天后,接着对在损伤环境中的神经元细胞进行Tuj-1免疫荧光染色,同时对存活的神经元进行计数并对神经突起的长度进行测量,比较激活态OECs对受损神经元存活和突起生长的影响。
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