引言 鸭瘟病毒(Duck plaque virus,DPV)属于疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科、马立克氏病毒属,是一种泛嗜性全身性感染的病毒.近些年关于鸭瘟病毒基因的研究发展迅速,本实验对UL54基因的基本特性进行初步研究,了解该基因在病毒感染过程中的表达及细胞内定位情况,为其功能研究奠定基础.材料和方法 原核表达鸭瘟病毒CHv株UL54蛋白作为抗原免疫兔子,制备兔抗血清.利用兔抗血清作一抗,通过western-blot检测不同时间点UL54蛋白在DEV感染情况下的表达量变化(1)和间接免疫荧光确定UL54蛋白在感染DEV的宿主细胞中的动态变化(2).利用荧光定量方法检测不同时间点UL54的转录情况及药物抑制试验确定其所属基因类型.结果 原核表达出约66.0KD左右的蛋白,并用western blot确定兔抗特异性.在病毒感染2h后用western-blot能检测到UL54蛋白,24h达到最大量,60h基本检测不到.应用荧光定量在0.5h就能检测到UL54蛋白的表达,药物抑制试验显示UL54为立即早期基因.UL54蛋白在12h之前主要是定位于细胞质中,随后慢慢地细胞核增加,到48h完全入核.讨论 UL54原核表达蛋白的大小与预测的理论值有些差异,主要是由于氨基酸的组成不同.转录时相和表达时相分析显示该蛋白表达高峰在24h,由于两种检测方法的灵敏性有差异,所以最早检测到蛋白表达的时间点不同.细胞内的动态变化显示UL54蛋白可能为一个核质穿梭蛋白,该类蛋白在病毒感染过程中具有很重要的作用.结论 鸭瘟病毒CHv株UL54基因是一个立即早期基因,在病毒感染后的0.5h就能检测到,24h达到最大量；UL54蛋白在感染早期主要定位细胞质,中后期主要定位于细胞核.