优化人单核细胞型淋巴瘤THP1细胞的电转条件

来源 :第十届北京国际康复论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyn_8305112002
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  目的:优化THP1 细胞的电转条件.方法 首先检测THP1 细胞完全培养基、无血清培养基和OPTI-MEMI 在不同体积下的电阻,其次通过调整不同的电压和电容的组合使细胞存活率在40%-50%之间,最后将不同质量的eGPF-N1 质粒电转入THP1 细胞并检测其电转效率.结果 THP1 细胞完全培养基、无血清培养基和OPTI-MEMI 在同一体积下的电阻一致,同一种培养基在不同体积下体积越大电阻越小;当细胞存活率在40%-50%之间时,适宜的电压和电容分别为300V 和150μ F;质粒质量对电转的影响表现为20μ g 质粒的转染率明显高于15μ g、25μ g 和30μ g.结论 本实验从培养基的选择、电压和电容的组合以及细胞浓度与质粒质量的比例这三个方面成功地优化了THP1 细胞的电转条件.
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