波纹唇鱼芳香化酶基因启动子克隆与分析

来源 :第六届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luijia2006
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  P450芳香化酶由Cyp19基因编码,是将睾酮转化为雌二醇的关键酶.鱼类的生殖腺原基具有雌性和雄性发展的双向潜力,芳香化酶通过调节雌、雄激素的比例进而参与调节鱼类的性别分化及性腺功能的维持.在硬骨鱼当中,被发现存在着两个芳香化酶基因:性腺型Cyp19a1a和脑型Cyp19a1b.Cyp19a1a在性腺中表达,其表达水平与性别调控及性腺发育直接相关;Cyp19a1b主要在脑中表达,可能间接影响性别分化.本文拟在实验室前期所获得的波纹唇鱼Cyp19a1a、Cyp19a1b基因cDNA的基础上,采用实时定量PCR技术、原核表达和WestemBlot技术分析Cyp19a1a基因的表达模式;采用Genomewalking扩增得到2个芳香化酶基因的启动子,使用甲基化特异性PCR和亚硫酸氢钠测序技术检测不同样本的Cyp19a1a、Cyp19a1a启动子的甲基化状态;采用补丁甲基化技术、双荧光报告基因检测技术及离体细胞培养进行Cyp19a1a、Cyp19a1a启动子甲基化调控活性分析.本文拟在社会性性逆转鱼类上进一步揭示芳香化酶基因的表达模式与表观修饰规律,并为理解鱼类性别分化机制提供新的证据.
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