【摘 要】
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SeNHX1基因是从盐生植物盐角草中(Saliconiaeuropaea L.)克隆得到的液泡型Na+/H+逆向运输蛋白基因,其表达的Na+/H+逆向运输蛋白定位在液泡膜上.液泡型Na+/H+逆向运输蛋白可将细胞质中的Na+转运至液泡中,其在维持细胞质内离子平衡,调节细胞质酸碱度和维持细胞渗透压等方面发挥着重要作用.为了探讨耐盐基因SeNHX1在烟草中的表达规律及其对转基因烟草耐盐性的影响,本研究
【机 构】
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河南科技学院,河南省新乡市华兰大道东段河南科技学院,453000
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SeNHX1基因是从盐生植物盐角草中(Saliconiaeuropaea L.)克隆得到的液泡型Na+/H+逆向运输蛋白基因,其表达的Na+/H+逆向运输蛋白定位在液泡膜上.液泡型Na+/H+逆向运输蛋白可将细胞质中的Na+转运至液泡中,其在维持细胞质内离子平衡,调节细胞质酸碱度和维持细胞渗透压等方面发挥着重要作用.为了探讨耐盐基因SeNHX1在烟草中的表达规律及其对转基因烟草耐盐性的影响,本研究课题利用农杆菌介导法对烟草进行耐盐基因SeNHX1转化,并对转化烟草植株进行分子生物学鉴定,利用RT-PCR、实时荧光定量PCR对SeNHX1基因在转基因烟草中的表达及表达量进行测定,并对转SeNHX1烟草在盐胁迫下的生理生化特征进行检测和分析.主要研究结果如下：(1)根据PCR检测结果,初步确定6株转SeNHX1基因烟草植株.(2)利用RT-PCR技术对转SeNHX1基因烟草进行检测,凝胶电泳都出现阳性条带.(3)利用实时荧光定量PCR检测SeNHX1基因在非转基因烟草和转基因烟草S1、S2、S3、S4、S5、S6中的表达量分别为：0％、20％、26.7％、14.29％、25％、12.5％、23.1％.(4)在盐胁迫下,非转基因烟草和转SeNHX1基因烟草的SOD、APX、CAT、POD活性和MDA含量随盐浓度的升高而升高；叶绿素含量随盐浓度的升高而下降.在相同NaCl胁迫浓度处理条件下,转SeNHX1基因烟草抗氧化酶活性和叶绿素含量均高于非转基因烟草,MDA含量低于非转基因烟草. (5)转SeNHX1基因烟草的T0代种子和非转基因烟草种子的发芽率随着盐浓度的升高而下降,在相同NaCl浓度的处理条件下,转基因烟草种子发芽率高于非转基因烟草种子发芽率.
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