【摘 要】
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以山羊外周血淋巴细胞RNA为模板,通过RT-PCR方法,获得了山羊γ干扰素(IFN-γ)基因,并将该基因克隆入pMD-18-T载体。序列测定结果表明,山羊IFN-γ基因的开放阅读框为501bp,编
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以山羊外周血淋巴细胞RNA为模板,通过RT-PCR方法,获得了山羊γ干扰素(IFN-γ)基因,并将该基因克隆入pMD-18-T载体。序列测定结果表明,山羊IFN-γ基因的开放阅读框为501bp,编码167个氨基酸;该基因与NCBI上公布的IFN-γ序列(GenBank登录号U34232)核苷酸序列同源性达99%,氨基酸同源性达98%;在第84位、271位和377位发生了突变,碱基分别由T突变为C、A突变为G、T突变为A,第1个为无意义突变,第2个突变引起第91位氨基酸由R变为G,第3个突变引起第126位氨基酸由L变为Q。将该基因亚克隆到原核表达载体pET32(a)并转化大肠杆菌BL21,IPTG进行诱导后通过SDS-PAGE检测其表达情况,结果发现山羊IFN-γ基因获得了表达,融合蛋白的大小为37 kDa。
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