【摘 要】
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背景 氧疗是临床上改善新生儿尤其是早产儿缺氧的重要治疗手段,但长时间吸入高浓度氧会导致不同程度的急慢性肺损伤和肺纤维化.目前高氧致肺损伤和肺纤维化的发病机制仍不清楚.Rho/Rock信号通路在多种组织纤维化发挥重要调控作用.目的 观察60％高氧培养对人胚肺成纤维细胞(HFL1)的影响及Rho/Rock信号通路抑制剂的干预作用.方法 以HFL1为研究对象,60％高氧培养0、6、12、24 h,利用B
【出 处】
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中国医师协会第一次全国儿童重症医师大会
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背景 氧疗是临床上改善新生儿尤其是早产儿缺氧的重要治疗手段,但长时间吸入高浓度氧会导致不同程度的急慢性肺损伤和肺纤维化.目前高氧致肺损伤和肺纤维化的发病机制仍不清楚.Rho/Rock信号通路在多种组织纤维化发挥重要调控作用.目的 观察60％高氧培养对人胚肺成纤维细胞(HFL1)的影响及Rho/Rock信号通路抑制剂的干预作用.方法 以HFL1为研究对象,60％高氧培养0、6、12、24 h,利用Brdu(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)渗入免疫荧光检测法观察HFL1的增殖情况；Wsetern blot法检测各时间点α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白、rock1、rock2、MYPT1蛋白的表达.同时以60％高氧24 h为对照组(分空气对照组(air)、高氧组(hyperoxia)、高氧+法苏地尔(5 μg/ml)组(hyperoxia+FSL)、高氧组+法苏地尔(10μg/ml)组(hyperoxia+FSH)和高氧+Y-27632 (10μ mol/L)组(hyperoxia+Y-27632),共5组.),观察高氧24 h下不同浓度法舒地尔(Fasudi1,FAS)及Y-27632对HFL1细胞增殖、转分化及胶原蛋白形成的影响,并观察其对促纤维化因子TGF-β和CTGF的影响.结果 ①60％氧暴露以时间依赖的方式促进HFL1增殖,向MLF转分化并促进胶原蛋白形成.②60％的氧暴露导致HFL1细胞的Rho/Rock信号通路活化：Rock1、Rock2及磷酸化MYPT1的蛋白表达于高氧暴露24h达高峰.③与高氧组比较,高氧组+法苏地尔(10 μg/ml)组与高氧+Y-27632 (10μ mol/L)组可抑制HFL1细胞增殖、向MLF转分化及胶原蛋白形成.④应用10μg/ml的法苏地尔或10 μ mol/L的Y-27632抑制Rho/rock信号通路后,TGF-β和CTGF的蛋白表达水平下降；而5 μg/ml的法苏地尔对TGF-β和CTGF的表达无明显影响.结论60％氧可能通过激活Rho/Rock信号通路促进HFL1增殖,向MLF转分化并促进胶原蛋白形成进而引发肺成纤维细胞细胞外基质表达增加等一系列促纤维化反应,抑制Rho/rock信号通路可以干预60％氧致纤维化因子的表达,可以干预肺成纤维细胞的增殖、转分化和纤维化形成.Rho/Rock信号通路有可能成为高氧肺损伤和纤维化的潜在治疗靶点.
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