【摘 要】
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目的:观察活化的脂肪源干细胞(AMSC)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效。方法:①AMSC分离培养及体外适当扩增:用0.2％的Ⅱ型胶原酶消化适量的脂肪组织30分钟。除去上层悬浮的
【机 构】
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河南省肿瘤医院血液科 河南省血液病研究所 郑州 450008
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目的:观察活化的脂肪源干细胞(AMSC)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效。方法:①AMSC分离培养及体外适当扩增:用0.2％的Ⅱ型胶原酶消化适量的脂肪组织30分钟。除去上层悬浮的成熟脂肪细胞和红细胞后,离心(200g×10min),再用70-100μm滤网连续过滤两次后将细胞用含2％人胎牛血清的磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤两遍,以2×106的浓度接种到培养瓶内。选择性扩增培养体系:57%D-MEM/F-12,40%MCDB-201,5%人AB型血清，1×胰岛素转铁蛋白硒，10-9M地塞米松，10-4M抗坏血酸2-磷酸盐，10ng/mL上皮细胞生长因子，1Ong/mL血小板源性生长因子，100U/mL青霉素，1000U/mL链霉素;②AMSC的活化:将经适当扩增培养的AMSC接种在含BMP-4及SCF等造血刺激因子的活化培养基中，定时检测其Flkl的表达变化情况，以Flk1的表达下调30%左右为AMSC已活化的标准;③移植活化的AMSC:患者(接受标准的以ATG为主免的疫抑制治疗9月余后无效)接受马法兰160mg/m2预处理后，经中心静脉输注活化的AMSC (2.1×106/kg，24小时后给予G-CSFSmg/kg·d。结果:移植后患儿造血于+20天即逐渐恢复，未出现明显不良反应;患者于+49天和+75天分别接受最后一次红细胞和血小板梳注后至今，已完全摆脱成分输血依赖性;骨髓穿刺、活检及细胞遗传学检查均提示正常;该患儿目前已经过较长时间(+679d)随访，未发现迟发性移植失败。结论:活化的AMSC可以作为挽救性治疗措施，尝试用于治疗已经接受以ATG为主的免疫抑制治疗无效的SAA患者。
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