【摘 要】
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目的：板蓝根(Isatis indigotica)是我国重要的传统中药材之一,其水煎液具有显著的抗病毒功效.前期研究发现板蓝根总多糖(ⅡP)能显著提高OVA抗原免疫小鼠的特异性抗体滴度.
【机 构】
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军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850
【出 处】
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全国第二届海洋与陆地多糖多肽及天然创新药物研发学术会议
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目的：板蓝根(Isatis indigotica)是我国重要的传统中药材之一,其水煎液具有显著的抗病毒功效.前期研究发现板蓝根总多糖(ⅡP)能显著提高OVA抗原免疫小鼠的特异性抗体滴度.总多糖采用DEAE-纤维素柱层析分离得到活性组分ⅡP-B,ⅡP-B对H1N1流感疫苗免疫小鼠具有显著的佐剂活性.本文将对ⅡP-B进行分离纯化获得活性成分,同时研究其理化性质,评价对乙肝疫苗的佐剂效果.方法：采用Sephadex G-100凝胶层析填科分离和纯化ⅡP-B,采用HGPC、CE、IR、NMR、GLC-MS及高碘酸钠氧化-Smith降解反应、甲基化反应等方法研究理化性质.采用肌肉注射方式免疫小鼠,评价ⅡP-2(200μg/鼠)对乙肝疫苗抗原(2μg/鼠)的佐剂效果.采用ELISA方法测定抗体滴度,采用MTT方法测定细胞增殖活性,采用试剂盒测定细胞因子含量.结果：从有效组分ⅡP-B中分离获得一个分子量均一的多糖ⅡP-2,其峰高分子量为66400 Da,由阿拉伯和半乳糖组成,单糖摩尔比为Ara：Gal=1.0∶1.5.结构解析表明ⅡP-2的主要骨架为β-(1→3,6)-半乳聚糖,同时还含有→1)-Gal,(1→6)-Gal,(1→5)-Ara和→1)-Ara等分支连接方式.ⅡP-2与乙肝抗原联用免疫小鼠2次,能显著提高血清特异性IgG、IgM、IgG1、IgG2a和IgG2b滴度,佐剂效果优于铝佐剂(200μg/鼠).同时ⅡP-2还能提高受免小鼠细胞免疫能力,促进脾细胞增殖和IFN-γ的分泌,调节T细胞向Th1方向分化.结论：板蓝根阿拉伯半乳聚糖是一种分子量均一多糖,理化性质相对明确和稳定,具有显著疫苗佐剂活性,有可能进行深入的研究和开发.
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