ntegrin β1 shRNA重组慢病毒载体的构建及其对Sombati癫痫细胞模型Integrin β1基因表达的影响

来源 :第九次全国脑电图与癫痫诊治进展高级讲授班及学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhang444051115
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  目的:构建大鼠整合素β1基因(integrinβ 1) RNA干扰慢病毒载体,为研究Sombati癫痫细胞模型integrin β 1的作用机制提供载体。方法 构建integrin β 1基因的4个shRNA慢病毒干扰载体,利用HEK 293T细胞进行慢病毒包装,感染靶细胞PC12,采用WestemBlot验证干扰效果,筛选出沉默效果最好的慢病毒shRNA,感染新生大鼠海马神经元细胞和Sombat癫痫细胞,通过Western Blot检测其对海马神经元和Sombati癫痫细胞integrin β 1的基因沉默效果。结果 经测序证实RNAi慢病毒载体构建成功,病毒达到有效滴度;Western Blot证实,重组慢病毒Integrin β 1 shRNA感染HEK293T细胞和Sombati癫痫细胞后integrin β 1蛋白表达下降。结论 成功构建integrin β 1RNA干扰慢病毒载体,并在新生大鼠海马神经元和Sombati癫痫细胞中实现有效的基因沉默效应。
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