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在研究“1998～2008年中国中部H9N2亚型AIV分离株HA基因的进化分析”时发现有二个致病性最强的毒株因HA基因第145位氨基酸的突变导致产生一个潜在的糖基化位点，从而使其不与抗H9亚型ALV HA单抗H6、F6等反应。为进一步探究这类变异毒株HA基因变异对H9亚型禽流感病毒的致病性的影响，本研究收集了12株(命名为N1、N2……N12)具有上述血凝素分子特征的H9流行毒株，进行了致病性方面的系统研究。结果显示这类毒株：1、在HA裂解位点处仅有1个碱性氨基酸，均为典型的低致病性AIV H9亚型毒株，但145位氨基酸均发生漂变(S→N)，导致在145～147aa多了一个糖基化位点NGT，并丧失了与单抗的血凝抑制反应特性。2、对SPF鸡胚、鸡和细胞的致病力大大增强。EID50、ELD50为10-8.0～-9.5／0.2ml，高于疫苗株1～2滴度，而MDT／MLD最低，多数在60～80h；1日龄SPF鸡的ICPI为0.23～1.7，6周龄SPF鸡的IVPI为0.21～1.1，而疫苗株均为0；可以在不加胰酶的CEF、CEK、DF-1、MDCK单层细胞上直接繁殖，12～24h出现病变。3、人工感染SPF鸡或免疫鸡，从第2天起均可从咽喉、泄殖腔分离到病毒，免疫抗体或同源抗体均不能阻止其攻毒后的排毒。表明这类毒株致病性的增加与HA基因的变异密切相关。因HA基因145—147aa位增加了一个NGT，蛋白结构软件分析显示血凝素头部蛋白减少了一个β折叠。三维空间构象的变化导致抗HA抗体作用位点的变异或缺失并影响其较近的受体结合位点，从而改变该毒株的抗原性和其它生物学特性。这一类变异株约占当前流行毒株总数的5—8％，是少数，但它更能逃避免疫作用或抵抗机体的防御机制，因而有更大的生存空间。在强大的免疫压力和自然选择下这类毒株有可能逐步成为优势毒株，造成更大的危害，这为该病的防控提出了新的挑战。