【摘 要】
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目的:对Z-大蒜烯(Z-ajoene)对肿瘤细胞的增殖抑制作用以及诱导凋亡作用的分子机制进行研究.方法:采用MTT及SRB法测定Z-大蒜烯对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用.Z-大蒜烯诱导的细
【机 构】
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北京大学医学部,天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京,100083
【出 处】
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中国药理学会制药工业专业委员会第十二届学术会议、中国药学会应用药理专业委员会第二届学术会议暨2006年国际生物医药及生物
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目的:对Z-大蒜烯(Z-ajoene)对肿瘤细胞的增殖抑制作用以及诱导凋亡作用的分子机制进行研究.方法:采用MTT及SRB法测定Z-大蒜烯对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用.Z-大蒜烯诱导的细胞凋亡采用AnnexinVFITC-RI双染法进行检测.Western-blotting蛋白印记法测定凋亡相关蛋白的表达.同时采用RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA水平的变化.结果:Z-大蒜烯对HL-60细胞的增殖有抑制作用,其抑制作用随着药物浓度的加大而增强.20μmol/LZ-大蒜烯作用12h后的HL-60细胞中凋亡细胞的比例明显增加,在48h时达到顶峰.同时,Z-大蒜烯诱导的细胞凋亡呈浓度依赖性,药物作用12h后,凋亡细胞的比例从5μmol/L作用后的23.8％增加到40μmol/L作用后的65.7％.进一步检测Bcl-2蛋白的表达,发现20μmol/LZ-大蒜烯作用仅2h后,即发生Bcl-2蛋白的磷酸化,作用持续至12h,早于细胞凋亡的发生.RT-PCR的结果表明,Z-大蒜烯作用后Bcl-2及caspase3基因的表达量显著降低,而BaxmRNA的水平则有所增加.同时还发现Z-大蒜烯作用后可显著降低c-myc蛋白的表达水平.结论:Z-大蒜烯对多种人肿瘤细胞系均有不同程度的抑制作用.Z-大蒜烯可导致Bcl-2蛋白的磷酸化与凋亡相关基因mRNA水平的降低,这种磷酸化的作用早于Z-大蒜烯诱导的凋亡.因此认为Z-大蒜烯诱导细胞凋亡的作用可能是通过诱导Bcl-2蛋白磷酸化的途径实现的.其结果为Z-大蒜烯进一步发展为一种新的抗肿瘤药物提供了理论基础.
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