离子排斥色谱是以较高交换容量的阳离子交换树脂作固定相的一种液相色谱方法,由于它只对弱电解质产生保留,在分析复杂样品中有机弱电解质时,能很好地避免强电解质和非电解质有机物的干扰,对生物、医药、食品、化工和环境样品中有机羧酸、氨基酸、核酸、核苷酸、糖、醇和无机弱酸等的分析,优于其它液相色谱分离模式.但是,离子排斥色谱在分析弱电解质时也经常遇到分离度、检测灵敏度等方面的问题.离子排斥色谱法最典型的应用是分离各种类型有机酸,流动相通常是纯水、稀强酸(如硫酸)或有机弱酸(如苯甲酸)水溶液.在用离子排斥柱分离脂肪羧酸时发现:以纯水作流动相时,脂肪羧酸的色谱峰严重展宽,并呈现不对称伸舌峰,分离效果较差;当用稀硫酸作流动相时,由于背景电导的增加使检测灵敏度显著降低,且共存阳离子有干扰;而用苯甲酸水溶液作流动相时,又出现强保留的系统峰而使分析时间过长.其实,这些问题是离子排斥色谱分离有机弱酸性物质时经常遇到的难题;如果能很好地解决上述问题,无疑离子排斥色谱在生命科学、食品科学等领域会发挥更重要的作用.可喜的是,我们在离子排斥柱上采用反液相色谱技术使上述难题得到了解决.例如:当我们以待分析的6种脂肪羧酸的混合溶液作流动相,将纯水从进样口注入色谱柱时,6种脂肪羧酸不仅在很短的时间内(12分钟)得到完全分离,而且分离效率、检测灵敏度和峰形均显著优于常规离子排斥色谱体系.将这种以样品溶液作流动相的液相色谱方法称为反液相色谱法(vacancy liquid chromatography).另外,在2-3个数量级范围内,标准曲线的线性很好,保留时间与峰面积的重现性也很好,这些都奠定了反液相色谱技术用于定量分析的基础.我们对几种不同类型有机弱酸在离子排斥柱上的反液相色谱体系的研究都得到了很好的结果.