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羟苯乙酯是短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX发酵液中主要功能成分之一，对其含量的检测目前依然采用纯化分离的方法，但由于该方法比较繁琐，因此，急需建立一种快速、简单、有效的检测方法对其进行定量检测.本研究建立了测定短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX发酵液功能成分羟苯乙酯的高效液相色谱法.以甲醇：水(65：35)作流动相洗脱，在波长254 nm进行检测.结果表明，羟苯乙酯在1.0-20 μg/mL的范围内呈良好的线性关系，相关系数达到0.9987.最低检测浓度为1.0× 10-15μg/mL.添加不同水平的羟苯乙酯回收率在96.2％-105.3％之间，平均RSD为0.8％，回收率较稳定.该方法简便，快速、灵敏度高，可用于短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX发酵液功能成分羟苯乙酯的检测分析.