【摘 要】
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为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素β1（IFN-β1）,本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组质粒p ET-IFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Ros
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院,吉林省野生动物救护繁育中心,吉林省中韩动物科学研究院
【基金项目】
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吉林省自然科学基金项目(201115194);国家国际科技合作专项(2011DFA32900)
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为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素β1（IFN-β1）,本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组质粒p ET-IFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）感受态细胞中,经IPTG诱导后,得到高效表达。SDS-PAGE与western blot分析结果表明,梅花鹿IFN-β1重组蛋白的分子量大小约为24 ku,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的59.02%。将Ni柱纯化的p ET-IFNβ1诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检
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