【摘 要】
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以青花菜绿彗星下胚轴为外植体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白基因CryIAc和CryIC分别导入青花菜栽培品种中。结果表明:CryIAc和CryIC基因分别转化
【出 处】
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中国园艺学会十字花科蔬菜分会第六届学术研讨会
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以青花菜绿彗星下胚轴为外植体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白基因CryIAc和CryIC分别导入青花菜栽培品种中。结果表明:CryIAc和CryIC基因分别转化青花菜,各获得35株卡那霉素抗性植株。分别以CryIAc和CryIC特异引物对转基因植株进行PCR扩增,结果得出27株CryIAc阳性植株和13株CryIC阳性植株。 以目的基因CryIAc和CryIC为探针,进行Soutlaernblot分析,证明多数植株目的基因已经整合到青花菜基因组中。对含有单拷贝目的基因植株自交纯合后通过有性杂交获得带有CryIAc和CryIC双价的转基因青花菜。利用RT—PCR检测Bt基因在转基因植株中的表达情况,发现不同株系间在RNA水平上存在显著的表达差异,部分株系中双价Bt同时得到表达。ELISA检测转基因植株Bz毒蛋白含量为0.12~0.82μgg-1FW。结合室内和田间饲虫试验,证明抗虫效果与Bt毒蛋白表达水平正相关。通过多世代选择,获得高抗菜粉蝶和小菜蛾的纯合转基因青花菜材料.现已获批进行转基因安全的中间试验。
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