微小牛蜱一个抗菌多肽编码基因的克隆和分析

来源 :上海市畜牧兽医学会2004年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jovkin
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本实验从微小牛蜱克隆到一抗菌多肽基因,全长383bp,编码110个氨基酸残基,该蛋白预测的分子量为12.2kDa,等电点为4.87.经同源性比较,该基因与Genbank数据库登录号为AAO48942,有100%的相同性.经RT-PCR分析表明,该基因在微小牛蜱卵、幼蜱、半饱血雌蜱、饱血雌蜱和雄蜱这几个阶段均有表达.将该基因亚克隆到pET-28a(+)表达载体,转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导,可成功表达.重组融合蛋白大小为15kDa左右,与预期大小一致.Western印迹分析表明,兔抗微小牛蜱唾液抗体能够识别重组表达蛋白.
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